Диагностические возможности лабораторного метода ELISPOT в выявлении туберкулезной инфекции при исследовании жидкости бронхоальвеолярного лаважа

Цель исследования. Определение диагностических возможностей тест-системы IGRA на основе платформы ELISPOT в выявлении специфически сенсибилизированных клеток при исследовании жБАЛ у больных туберкулезом легких, включая пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Материалы и методы. Проанализирована чувствительность лабораторной тест-системы ELISPOT при исследовании жидкости бронхоальвеолярного лаважа и периферической крови от 70 больных впервые выявленным туберкулезом органов дыхания и 31 больного коинфекцией ВИЧ/туберкулез. Образцы материала от каждого пациента исследовали иммунологическим методом с использованием тест-системы T-SPOT®.TB (Oxford Immunotec Limited, UK).
Результаты. У ВИЧ-негативных пациентов анализ жидкости бронхоальвеолярного лаважа позволяет повысить клиническую чувствительность лабораторной тест-системы до 81,4% (95%ДИ 70,8-88,8%) по сравнению с анализом периферической крови (74,3%; 95%ДИ 63,0-83,1%). У ВИЧ-инфицированных пациентов исследование жидкости бронхоальвеолярного лаважа привело к снижению клинической чувствительности тест-системы до 61,3% (95% ДИ 43,8-76,3%) по сравнению с анализом периферической крови (77,4%, 95% ДИ 60,2-88,6%; р < 0,05).
Заключение. Исследование жидкости бронхоальвеолярного лаважа с помощью тест-системы T-SPOT®.TB позволяет повысить выявляемость туберкулезной инфекции преимущественно у пациентов, не инфицированных ВИЧ.

1. Ванеева Т.В., Абу-Аркуб Т.И., Куликовская Н.В. и др. Использование лабораторного иммунологического теста для исследования плевральной жидкости при диагностике туберкулезного плеврита // Туберкулез и социально значимые заболевания. – 2019. – Т. 19, № 3. – C. 17-22.

2. Патент 2708388 Российская Федерация. Способ модификации теста для in vitro диагностики туберкулезного плеврита. / Ванеева Т.В., Куликовская Н.В., Абу-Аркуб Т.И. и др. Заявитель и патентообладатель: ГБУЗ «Московский городской научно-практический центр борьбы с туберкулезом Департамента здравоохранения города Москвы». – № 2019110224; заявл. 08.04.2019; опубл. 06.12.2019, Бюл. № 34.

3. Федеральная служба государственной статистики [Электронный ресурс]. URL: rosstat.gov.ru (дата обращения: 04.03.2025)

4. Цыбикова Э.Б., Пунга В.В., Русакова Л.И. Туберкулез, сочетанный с ВИЧ-инфекцией, в России: статистика и взаимосвязи // Туберкулез и болезни легких. – 2018. – Т. 96, № 12. – С. 9-17.

5. Bunjun R., Riou C., Soares A.P. et al. Effect of HIV on the frequency and number of Mycobacterium tuberculosis-specific CD4+ T cells in blood and airways during latent M. tuberculosis infection // J. Infect. Dis. – 2017. – V. 216, № 12. – P. 1550-1560.

6. Bunjun R., Soares A.P., Thawer N. et al. Dysregulation of the Immune Environment in the Airways During HIV Infection // Front. Immunol. – 2021. V. 12. P. 707355.

7. Chen X., Yang Q., Zhang M. et al. Diagnosis of active tuberculosis in China using an in-house gamma interferon enzyme-linked immunospot assay // Clin. Vaccine Immunol. – 2009. – Vol.16, № 6. – P. 879-884.

8. Day C.L., Abrahams D.A., Harris L.D. et al. HIV-1 Infection is associated with depletion and functional impairment of Mycobacterium tuberculosis-specific CD4 T cells in individuals with latent tuberculosis infection // J. Immunol. – 2017. – V. 199, № 6. – P. 2069-2080.

9. Global tuberculosis report 2023. Geneva: World Health Organization; 2023. Licence: CC BY-NC-SA 3.0 IGO.

10. Guo Q., Zhang J., Li G. et al. Elevated antigen-specific IFN-γ responses in bronchoalveolar lavage fluid impervious to clinical comorbidities improve the pulmonary tuberculosis diagnosis // Tuberculosis (Edinb). – 2020. – Vol. 122. – P. 101942.

11. Herrera M.T., Guzmán-Beltrán S., Bobadilla K. et al. Human pulmonary tuberculosis: understanding the immune response in the bronchoalveolar system // Biomolecules. – 2022. – V. 12, № 8. – P. 1148.

12. Jambo K.C., Banda D.H., Afran L. et al. Asymptomatic HIV-infected individuals on antiretroviral therapy exhibit impaired lung CD4(+) T-cell responses t o mycobacteria // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. – 2014. – V. 190, № 8. P. 938-947.

13. Kim S.H., Cho O.H., Park S.J. et al. Rapid diagnosis of tuberculous meningitis by T cell-based assays on peripheral blood and cerebrospinal fluid mononuclear cells // Clin. Infect. Dis. – 2010. – V. 50., № 10. – P. 1349-1358.

14. Li H., Yang L., Zheng C.Y. et al. Use of bronchoalveolar lavage enzyme-linked immunospot for diagnosis of smear-negative pulmonary tuberculosis // Int. J.Tuberc. Lung. Dis. – 2012. – V. 16, № 12. – P.1668-1673.

15. Li J., Jing Q., Hu Z. Et al. Mycobacterium tuberculosis-specific memory T cells in bronchoalveolar lavage of patients with pulmonary tuberculosis // Cytokine. – 2023. – Vol. 171. – P.156374.

16. Liao M., Yang Q., Zhang J. et al. Gamma interferon immunospot assay of pleural effusion mononuclear cells for diagnosis of tuberculous pleurisy // Clin. Vaccine Immunol. – 2014. – Vol.21, № 3. – P. 347-353.

17. Liu F., Du F.J., Jia H.Y. et al. Inadequate values from an interferon-gamma release assay for smear-negative tuberculosis in a high-burden setting // Int. J. Tuberc. Lung. Dis. – 2014. – V. 18, № 12. – P. 1496-1501.

18. Liu X., Hou X.F., Gao L. et al. Indicators for prediction of Mycobacterium tuberculosis positivity detected with bronchoalveolar lavage fluid// Infect. Dis. Poverty // 2018. – V. 7, № 1. – P. 22.

19. Metcalfe J.Z., Everett C.K., Steingart K.R.et al. Interferon-γ release assays for active pulmonary tuberculosis diagnosis in adults in low- and middle-income countries: systematic review and meta-analysis // J. Infect. Dis. – 2011. – Vol. 15 № 204. – P. 1120-1129.

20. Meyer K.C., Raghu G., Baughman R.P. et al. An official American Thoracic Society clinical practice guideline: the clinical utility of bronchoalveolar lavage cellular analysis in interstitial lung disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2012. – V. 185, № 9. – P. 1004-1014.

21. Muema D.M., Mthembu M,, Schiff A.E. et al. Contrasting inflammatory signatures in peripheral blood and bronchoalveolar cells reveal compartment-specific effects of HIV infection // Front. Immunol. – V. 11. – P. 864.

22. Petrelli A., Mijnheer G., Hoytema van Konijnenburg D.P. et al. PD-1+CD8+ T cells are clonally expanding effectors in human chronic inflammation // J. Clin. Invest. –. 2018. – V. 128, № 10. – P. 4669-4681.

23. Shi F., Qiu X., Yu M. et al. Tuberculosis-specific antigen stimulated and unstimulated interferon-γ for tuberculous meningitis diagnosis: A systematic review and meta-analysis // PLoS One. – 2022. – Vol. 17 № 8. – e0273834.

24. Thomas M.M., Hinks T.S., Raghuraman S. et al. Rapid diagnosis of Mycobacterium tuberculosis meningitis by enumeration of cerebrospinal fluid antigen-specific T-cells // Int. J. Tuberc. Lung. Dis. – 2008. – V. 12, № 6. – P. 651-657.

25. Wilkinson K.A., Wilkinson R.J., Pathan A. et al. Ex vivo characterization of early secretory antigenic target 6-specific T cells at sites of active disease in pleural tuberculosis // Clin. Infect. Dis. – 2005. – V. 40, № 1. – P. 184-187.

26. Xiao G., Huang W., Zhong Y. et al. Uncovering the bronchoalveolar single-cell landscape of patients with pulmonary tuberculosis with human immunodeficiency virus type 1 coinfection // J. Infect. Dis. – 2024. – V. 230, № 3. P. 524-535.

27. Zhang M., Wang H., Liao M. et al. Diagnosis of latent tuberculosis infection in bacille Calmette-Guerin vaccinated subjects in China by interferon-gamma ELISpot assay // Int. J. Tubercul. Lung. Dis. – 2010. – Vol.14, № 12. – P. 1556-1563.